语言
English Français Español Português Deutsch عرب

糖化多种检测方法该如何选择

2023-07-05 15:03:22

现如今糖尿病在全球形式依旧严峻。《2021IDF全球糖尿病地图(第十版)》在2021年12月6号在国际糖尿病联合会官网发布,糖尿病已然成为21世界增速最快的全球突发性卫生事件之一,患病人数高达5.37亿人,其中以2型糖尿病为主。而在新发布的《2022IDF全球糖尿病地图》,2022年全球1型糖尿病患者有875万,其中152万人年龄在20岁以下。

中国拥有大量的2型糖尿病患者也有较多的1型糖尿病患者,作为全球糖尿病患者数第一的国家,将面临着非常严峻的糖尿病防控挑战。如何早期筛查糖尿病患者,减少患者死亡率,提高患者生活质量成为社会各界所关心的问题。

糖化多种检测方法该如何选择

糖化血红蛋白,简称:HbA1c,一种血红蛋白与葡萄糖进行非酶促反应结合的产物,生成是一个缓慢的,且不可逆的过程,生成量与血糖浓度、高血糖存在的时间以及红细胞寿命相关。HbA1c可以有效的反映过去8-12周体内平均血糖水平,且具有结构稳定的特点,在临床上也常用作糖尿病控制的监测指标。在《中国2型糖尿病防治指南(2020年版)》的诊断标准中也明确指出HbA1c为2型糖尿病诊断标准之一。

对于糖化血红蛋白有哪些常用的检测方法

1.离子交换高效液相色谱法

离子交换高效液相色谱法(HPLC)为检测HbA1c金标准,其具有操作简单、检测快速、精密度好的特点,对于长期保存的待测标本依然具有良好的稳定性,能够及时发现常见的血红蛋白变异体,非常适合大批量标本的同时测定[1]。

2.亲和色谱法

亲和色谱法又称为亲和层析法。该方法学使用硼酸和总糖化血红蛋白在层析柱处进行结合,非糖化血红蛋自直接流出层析柱并被测量,再经过山梨醇等二醇基的多邦基复合物加入后,将糖化血红蛋白洗脱下来并进行测量,最后计算比值。此方法简单易行,快速准确,结果可靠,试剂稳定,且不受异常血红蛋白(HbS、HbC、HbE等)干扰,方法测定为总糖化血红蛋白,允许用经验算法计算出“标准的 HbA1c”[1]。

3.电泳法

电泳法主要分为琼脂糖凝胶电泳、等电聚焦电泳和毛细管电泳3种,检测原理都是基于血红蛋白所带电荷的不同,进而导致在电场中迁移速率不同而进行分离。通过光密度扫描,可精确测定出各组分的含量,通常以百分含量(%)表示[1]。

4.免疫化学法

利用血红蛋白B链糖化N末端的48个氨基酸残基作为抗体识别位点制备单克隆抗体,再利用抗原抗体结合反应而建立:离子捕获法、乳胶凝集免疫比浊法、胶乳凝集抑制法、酶免疫法、放射免疫法[1]。

5.酶法

使用蛋白酶切断糖化血红蛋白B链N末端的糖化甘氨酷谷氨酷胺,利用600nm与800nm的吸光度差求出Hb浓度,再经过过氧化物酶的作用下进行一些列的显色反应通过吸光度求出HbA1浓度,再进一步计算出HbA1c%。此方法适用于全自动生化分析仪上使用,具有快速,操作简单和成本低的特点。且与HPLC和免疫法具有良好的相关性[1]。

不同检测方法的影响因素

糖化血红蛋白的检测方法颇多,对于临床样本的抗干扰能力又各不相同,有研究发现:样本类型对于亲和层析法、HPLC法检测HbA1c无干扰;当乳糜微粒(CM)≥15000FTU时,免疫比浊法测定HbA1c有干扰;游离胆红素(F-Bil)、结合胆红素(C-Bil)≥121.3umol/L时酶法检测高浓度HbA1c有干扰;当F-Bil≥196.8umol/L、C-Bil≥121.3umol/L时,酶法检测低浓度HbA1c有干扰[2]。

糖化多种检测方法该如何选择

收集285名健康体检者以及住院就诊的115例糖尿病患者对离子交换HPLC法和亲和层析色谱法两种检测方法进行比对实验。最终实验结果表明,硼酸盐亲和色谱法测定HbA1c线性范围为4.0%-15%间平均CV分别为1.0% 和1.8%,与离子交换HPLC法比较具有高度相关性。本地区95%健康人群HbA1c分布区间为4.2%-6.0%;本法测定HbA1c切点为6.1%时,诊断糖尿病的敏感性为80.2%,特异性为87.6%,与文献[4]报告的结论接近[3]。

糖化多种检测方法该如何选择

所以正确的去使用各种检测原理的糖化血红蛋白分析仪才能更加客观的反应各类患者的血糖水平;例如酶法检测应剔除黄疸标本;免疫比浊法应避免高乳糜微粒标本;遇到大量异常糖化血红蛋白时使用亲和层析色谱法更加准确等。

J9九游会J9糖化血红蛋白解决方案

J9九游会J9对于糖化血红蛋白有着多种解决方案:离子交换高效液相色谱法GSH-60、硼酸亲和色谱法A1cGo、免疫散射比浊法(免疫化学法)Nephstar、Omlipo、Astep、Aristo等特定蛋白分析仪,可从多个角度对糖化血红蛋白进行分析,在保证检测结果准确性的前提下满足不同实验室需求。

糖化多种检测方法该如何选择

糖化多种检测方法该如何选择

参考文献:

[1] 黄颖,樊希承.糖化血红蛋白几种常见检测方法[J]. 临床和实验医学杂志,2009,8(2):126 127.

[2] 陈颖,温冬梅等.四种方法检测糖化血红蛋白的干扰性能评价木临床检验杂志2013年10月第31卷第10期

[3] 童华诚 袁群 张美 马敏敏.硼酸盐亲和色谱法测定 HbA1c效果评价中国糖尿病杂志2012年10月第20卷第10期

[4] 陈立立,刘超 .HbA1c用于糖尿病的诊断与筛查 .中国糖尿病杂志,2021,18:73-76